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实验设备

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毛细管电泳仪(贝克曼公司)

Beckman P/ACETM MDQ毛细管电泳仪 


软件使用步骤:


1. 开机:分别启动电泳仪和IBM电脑开关。


2. 启动32 Karat软件:双击桌面上32 Karat软件图标,或者从windows工具跳上开始菜单按钮选择,具体见图1所示。32 Karat软件启动后打开列出已设置的仪器主窗口,如图2所示。 

图1. 软件在开始菜单中的位置 

图2. 32 Karat软件主窗口


3. 打开控制软件:打开在线控制软件(online software), 可以双击DAD图标,或者右键单击DAD图标,选择“Open”;打开离线处理软件(offline software), 右键单击DAD图标,选择“Open offline”。

4. 直接控制(Direct control window)窗口:直接控制屏幕相当于仪器的面板操作。可以对仪器的操作参数进行既时修改,直接控制对操作准备、维修保养和故障排除非常有用。在直接控制界面通过用鼠标点击相应的区域来控制仪器,并且可以看到仪器的现时状态,如图3所示。 



图3 直接控制示意图。示例如下:1:毛细管温度;2:托盘上/下;3:标签说明;4:灯开关;5:检测器对话框;6:调零;7:托盘回到原始设置的位置;8:托盘到装载位置;9:进样对话框;10:停止当前步骤或程序;11:样品存储温度;12:电压对话框;13:电流对话框;14:功率对话框;15:压力对话框;16:瓶位置对话框。 


通过直接控制面板,可以进行更换缓冲液、冲洗毛细管、开关DAD灯、设置毛细管及样品存储的温度等很多事情。


5. 编辑方法。要进行毛细管电泳实验,一般都需要以下几个步骤:碱液、水、背景电解质依次冲洗毛细管;样品进样;电泳分离等。典型的方法示意图如图4所示。 



图4 典型的方法示意图。1:instrument setup,调出该方法编辑器;2:时间程序,分析步骤次序;3:时间;4:事件,包括冲洗、进样、分立、借书等步骤;5:数值;6:某个事件发生的时间;7:进样端样品瓶位置;8:出口端样品瓶位置;9:事件描述。 


该方法叙述的分析过程是:首先在20.0p.s.i条件下,由碱液(A3-A2)、水(A2-A2)、背景电解质(C2-A2)依次冲洗毛细管1min,2min,3min;其次,压力(0.5p.s.i)进样5s(B2-C2);再次,电压20kV分离20min(C2-C2);最后,分析时间20min后自动停止运行方法。可以根据自己所需,调整事件及其数值和分析时间。 

6. 编辑检测波长、样品存储及毛细管温度。DAD检测器一个优点就是可以同时多波长检测,在”PDA Detector Initial Conditions” 中,可以设置所需的检测波长,如图5所示。 


图5 设置检测波长。1:多通道扫描波长;2:检测波长. 

在”Initial Conditions”中,可以设置样品存储及毛细管的温度,另外,通过选择”Current”,可以显示分离过程中的电流变化图,其示意图如图6所示。 


图6 方法初始条件设置示意图。1:选择电流;2:毛细管温度;3:样品存储温度。 

7. 保存所编辑的方法。步骤5、6结合组成一个完整的分析方法,完成编辑后保存,如图7所示。 


图7 运行方法示意图。1:保存方法;2:运行单个方法;3:停止所运行的方法。 

8. 运行方法并保存数据。单击图7中的“2”,就会跳出图8,选择保存的路径、数据名称即可。如果在运行方法过程中,要停止采集数据,即可单击图7中的“3”。 


图8 数据保存 

更多有关软件使用、数据处理等方面的信息,请参考Beckman英文版使用说明书。